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海参营养素的抗疲劳作用
文章来源:互联网    2017-8-14 10:23:00
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[ 目的 ] 为了检验海参营养素是否具有抗疲劳作用,进行了此项研究。

[ 检验海参营养素是否具有抗疲劳作用方法 ] 首先进行剂量分组,按推荐人体日摄入量( 2g/60kg 体重)的 30 倍、 20 倍、 10 倍设计,分 3 个实验组及蒸馏水对照组。管饲法染毒。动物实验室温度( 25 ± 2 )℃,每日称体重后灌胃 1 次,连续 30 天后分别测定以下各项抗疲劳作用指标。小鼠负重游泳试验:末次给予受试物 30mim 后,称体重,鼠尾根部负责 5 %体重铅皮,置于游泳箱中游泳。记录自游泳开始至死亡时间( min );肝素原测定(蒽酮法):末次给予受试物 30min 后处死,取肝脏,称取 200mg 。加入 4.0mlTCA ,每管匀浆 1min ,将匀浆液 30r/min 离心 15min ,把上清液移至另一试管内,在沉淀中再加入 4.0mlTCA ,匀浆 1min ,再离心 15min 。合并混匀两次上清液。取 1.0ml 上清液放入 10ml 离心管中,每管中加入 95 %乙醇 4.0ml ,充分混匀,加塞,室温下竖立放置过液,沉淀完全后, 3000r/min 离心 15min ,弃去上清液,使试管倒立 10min 。用 2.0ml 蒸馏水溶解肝糖原,将 10.0ml 蒽酮试剂用力加入各管,放入沸水浴 15min ,再移至冷水浴,冷却至室温,在波长 620nm 处比色,用空白管调零,计算肝糖原含量。血乳酸测定:末次给予受试物 30min 后,尾根部负重,置于游泳箱中游泳。第 60min 取出,静止 15min ,摘眼球采血。于 5ml 试管中加入 0.481 % NaF 溶液,准确吸取全血 20ul 加入试管底部,用试管上清液清洗微量吸管数次,再加入 1.5ml 蛋白沉淀剂,振荡混匀。于 3000r/min 离心 10min ,取上清液 0.5ml 加入沉淀管,取乳酸标准应用液 0.5ml 加入标准管,取沉淀剂 -NaF 混合液 0.5ml 加入空白管,向各管中加入 0.1ml 4% CuSO 4 ,再加入 3.0ml 浓硫酸,充分混匀,置沸水浴加热 5min ,取出放入冰水浴冷却 10min ,向各管中加入 0.1ml 1.5% 对羟基联苯摇匀,置( 30 ± 1 )℃水浴 30min ,再放入沸水浴加热 90s ,取出冷却至室温,在波长 560nm 处用 5mm 光径比色皿比色,空白管调零,计算血乳酸含量。血清尿素氮、血清乳酸脱氢酶、血糖测定,按试剂盒使用说明操作,用 COBAS MIRA 全自动化分析仪测定。

[ 海参营养素的抗疲劳结果 ] 海参营养素能延长小鼠的游泳时间,增加小鼠肝糖原含量,减少小鼠血乳酸含量,对小鼠血清尿素氮、乳酸脱氢酶、血糖作用不明显;对实验动物的体重增长无明显影响。

[ 结论 ] 在本实验条件下,表明海参营养素可能具有一定的抗疲劳作用。


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